孙展 , 郑兴卫 , 李聪 , 苗丽宏

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京, 100193
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 4 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000025
收稿日期: 2013年04月26日    接受日期: 2013年06月10日    发表日期: 2013年06月14日

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为获得抗草甘膦苜蓿株系，本研究在抗草甘膦基因GR79Mt序列前加叶绿体转运肽基因CTP2序列，并在启动子和终止子两端分别加入PvuⅠ酶切位点，插入到载体pCAMBIA2300中，成功构建植物表达载体pCA-GM。采用CaCl₂冻融法将其转入农杆菌中，进一步基于农杆菌介导法进行了目的基因的拟南芥和紫花苜蓿转化。经PCR和RT-PCR验证，目的基因已转入拟南芥中。本研究共得到12株苜蓿抗性苗，经PCR分析鉴定，其中两株转化成功，结果初步表明已将目的片段基因转入苜蓿中。本研究可为抗除草剂苜蓿的应用提供了种质资源和参考方法。

拟南芥；紫花苜蓿；载体构建；草甘膦抗性；遗传转化